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胚胎學(xué)家如何處理基本正常的精液樣本?如何處理特殊的精液標(biāo)本?

在試管嬰兒助孕過程中,需要女方提供優(yōu)質(zhì)的卵子,男方提供高質(zhì)量的精子。試管嬰兒技術(shù)有兩種受精方式:常規(guī)體外受精和卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射受精。理論上,卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射受精需要一條精子,而常規(guī)體外受精需要5000到10000條優(yōu)質(zhì)精子。下面,我將介紹胚胎學(xué)家們?nèi)绾蝺?yōu)化精液,獲取優(yōu)質(zhì)精子。

胚胎學(xué)家如何處理基本正常的精液樣本?如何處理特殊的精液標(biāo)本?

胚胎學(xué)家如何處理基本正常的精液樣本?

胚胎學(xué)家使用三種主要方法優(yōu)化精子:密度梯度離心法、直接上游法和簡單洗滌法。

密度梯度離心法利用精子的運(yùn)動能力和細(xì)胞密度的差異來分離精子,使其在試管底部形成沉淀,從而得到質(zhì)量較好的精子,這些精子無白細(xì)胞、無不成熟生殖細(xì)胞。

直接上游法是通過精子自身的運(yùn)動能力將其從精液中分離。這種方法可以得到活力強(qiáng)的精子。這就是將培養(yǎng)液加到液化精液上面,或者將液化精液加到培養(yǎng)液上面,活動的精子會游到培養(yǎng)液里。結(jié)合密度梯度離心和上游法篩選出來的精子不僅活力強(qiáng),損傷少,而且能更好地排除雜質(zhì)的影響,對提高精子存活率和DNA完整性有良好效果。

簡單洗滌法是向精液中加入等體積的培養(yǎng)基以稀釋精液,離心后去掉上清液,收集沉淀物重新懸浮在培養(yǎng)基中并再離心,棄去上清液后將沉淀物重新懸浮在適量的培養(yǎng)基中備用。這種方法不能去除死精子、碎片和其他細(xì)胞成分,如白細(xì)胞、圓形細(xì)胞。因此,現(xiàn)在體外受精通常不使用這種方法。但對于嚴(yán)重少弱精癥的精子制備、睪丸活檢或睪丸顯微切開取精術(shù)收集的睪丸精子,仍可使用這種方法,因?yàn)樵谶M(jìn)行卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射受精時,活動精子是由操作者在倒置顯微鏡下人工收集和獲取的。

胚胎學(xué)家如何處理基本正常的精液樣本?如何處理特殊的精液標(biāo)本?

胚胎學(xué)家如何處理特殊的精液標(biāo)本?

在臨床工作中,胚胎學(xué)家會遇到一些特殊情況,如逆行射精、精液液化異常、精液量過少和精液中含有大量顆粒狀物質(zhì)。

逆行射精是指精液進(jìn)入膀胱而非尿道口。對此,醫(yī)生會讓患者在取精前口服碳酸氫鈉,然后取精前排尿,但不完全排空膀胱。取精時,精液和尿液會被收集在不同的容器中。胚胎學(xué)家會用密度梯度離心法處理精液,對于尿液,他們會先用培養(yǎng)基中和,然后通過離心法濃縮,再用密度梯度離心法獲取優(yōu)質(zhì)精子。

對于不液化的精液,胚胎學(xué)家會用吸管輕柔地吹打。如果還是不液化,他們會加入培養(yǎng)液再次吹打。

如果精液量過少,他們會加入培養(yǎng)液增加體積,以便離心。

如果精液中含有大量顆粒狀物質(zhì),他們會先通過簡單離心將顆粒狀物質(zhì)沉降,再吸取上層精液進(jìn)行后續(xù)處理。

如何保證精液的處理不出錯?在我們的中心,每個離心機(jī)只處理一個患者的精液標(biāo)本。一份標(biāo)本處理完畢后,才會處理下一個。此外,每個患者的試管上都有電子標(biāo)簽,顯示夫妻的姓名和病歷號。在每一步處理前,都會掃描電子標(biāo)簽進(jìn)行核對,并有兩個人進(jìn)行人工核對,確保精液處理的準(zhǔn)確無誤。

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